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簡單介紹層析冷柜采用的層析技術和使用原理

發布時間:2021-11-15 13:42:06瀏覽:62次

  層析技術是近代生物化學常用的分離技術之一。它是利用混合物中各組分的理化性質(吸附力、分子形狀和大小、分子極性、分子親和力、分配系數等)的差異,在兩相運動中,不斷地進行交換、分配、吸附及解吸附等過程,可將各組分間的微小差異經過相同的重復過程而達到分離。配合相應的光學、電學和電化學檢測手段,可用于定性、定量和純化某種物質,其純度高達99%。層析法的特點是分離率、靈敏度(pg-fg級)、選擇性均高的一種分離方法。尤其適合樣品含量少,而雜質含量多的復雜生物樣品的分析。
  
  層析冷柜就是采用這種技術,專為生化層析實驗而研制的特殊用途冷柜,主要用在生命科學研究的高校學科和科研院所,主要用來進行各種酶類,肽類,大分子,核酸等物質的生化層析分析試驗。也可用于其他需要低溫環境的實驗,或用于物品冷藏。層析冷柜專門為對溫度要求很高的各種應用設計,可以在箱內操作層析設備和其它簡易安裝的儀器和設備。
  
  使用原理如下:
  生物分子間存在很多特異性的相互作用,它們之間都能夠專一而可逆的結合,這種結合力就稱為親和力。親和層析就是通過將具有親和力的兩個分子中一個固定在不溶性基質上,利用分子間親和力的特異性和可逆性,對另一個分子進行分離純化。被固定在基質上的分子稱為配體,配體和基質是共價結合的,構成親和層析的固定相,稱為親和吸附劑。
  
  親和層析時先選擇與待分離的生物大分子有親和力物質作為配體,并將配體共價結合在適當的不溶性基質上。將制備的親和吸附劑裝柱平衡,當樣品溶液通過親和層析柱的時候,待分離的生物分子就與配體發生特異性的結合,從而留在固定相上;而其它雜質不能與配體結合,仍在流動相中,并隨洗脫液流出,這樣層析柱中就只有待分離的生物分子。通過適當的洗脫液將其從配體上洗脫下來,就得到了純化的待分離物質。
 

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